杭白菊是著名的浙江道地药材“浙八味”之一，也是卫生部批准的药食两用资源，具有散风清热、平肝明目、清热解毒的功效，用于风热感冒、头痛眩晕、目赤肿痛、眼目昏花、疮痈肿毒[1]。由于杭白菊在种植过程中易受病虫草害影响，不可避免地会使用各类农药，然而不科学的使用最终导致产品本身难逃农药的污染，严重影响中药材的品质和食用安全。农药残留问题已成为中药材安全的一大隐患。
近年来，人们对中药材农药残留问题越来越重视，农药残留测定技术得到了快速发展。农药种类繁多，常见的包括有机氯类、有机磷类、拟除虫菊酯类及氨基甲酸酯类农药等，受检测器的限制，GC等仅限于单一种类的农药残留测定，而色谱质谱联用技术[2-4]能很好地克服这一缺陷，可同时测定多个不同种类的农药，而且灵敏度高、选择性好，已成为农药多残留分析的一种趋势。此外，样品前处理技术也在不断发展更新，应用较多的有QuEChERS方法[5-6]、加速溶剂萃取法[7]、固相萃取法[8]和凝胶渗透色谱法 [9]等。虽然我国中药材农药残留相关标准也在逐步提高，但仍需不断完善。现行中国药典2015年版中仅对人参、甘草、西洋参和黄芪 4种药材中的有机氯类农药残留限量作了相关规定，而对大部分药材和农药品种并未提出相关标准。已报道文献中，针对杭白菊中农药残留测定的研究多针对少数或某一类农药的分析[10-11]。
因此，本研究在调研杭白菊田间实际使用的农药品种基础上，结合中国药典2015年版四部的农残检测指标[12]，建立了同时测定杭白菊中68种农药残留的GC-MS/MS分析方法，农药品种涵盖有机磷、有机氯及拟除虫菊酯等多个种类，该方法简单、快速、灵敏、高效，可用于杭白菊中农药多残留的快速筛查和定量分析，也可为药农在种植过程中合理规范喷洒农药提供有效依据。
1 仪器与试药
Agilent 7890B/7000D型气相色谱-三重四极杆质谱联用仪(美国 Agilent公司)；XS105电子天平(瑞士 Mettler Toledo 公司)；100 μL，1 000 μL，5 mL移液器(德国Eppendorf公司)；MS3 basic旋涡混合器(德国 IKA)；KS 260控制型摇床(德国 IKA)；MD200-1氮气吹扫仪(杭州奥盛仪器有限公司)；TGL-10B高速台式离心机(上海安亭科学仪器厂)。
乙腈、丙酮、乙酸乙酯、环己烷、正己烷均为色谱纯，购于美国Tedia公司；石油醚为分析纯，购于国药集团化学试剂有限公司；冰醋酸、无水硫酸镁、无水乙酸钠为分析纯，购于上海麦克林生化科技有限公司；氦气、氮气购于杭州今工气体，纯度≥99.999%；水为超纯水。
QuEChERS净化填料：石墨化炭黑(120～400 mesh)，硅胶(50 μm)，C18(50 μm)，PSA(40～60 μm)，均购于天津博纳艾杰尔科技有限公司。
农药对照品及内标购自德国 Dr. Ehrenstorfer公司、农业部环境保护科研监测所，对照品纯度＞96.96%。40批杭白菊均产自桐乡，来源于不同杭白菊种植基地，经浙江省中药研究所有限公司药材资源中心沈宇峰高级工程师鉴定，均为菊科植物菊Chrysanthemum morifolium Ramat的干燥头状花序。
2 方法与结果
2.1 色谱及质谱条件
采用柱中反吹技术，色谱柱1和色谱柱2均为Agilent HP-5MS UI毛细管柱(15 m×0.25 mm，0.25 μm)；载气为高纯氦气，恒定流量0.8 mL·min-1；进样口温度280 ℃，不分流进样，进样量 1 μL；程序升温：初始温度 70 ℃，保持2 min，以 25 ℃·min-1升温至 150 ℃，以 3 ℃·min-1升温至 200 ℃，以 8 ℃·min-1升温至 280 ℃，保持8 min，最后310 ℃后运行5 min。离子源为电子轰击离子源(EI)，70 eV，离子源温度 300 ℃，辅助加热器温度 280 ℃，四极杆温度 150 ℃，碰撞池碰撞气为高纯氮气，流量为1.5 mL·min-1，淬灭气为高纯氦气，流量为2.25 mL·min-1，监测模式为动态多反应监测(dMRM)，各农药化合物其他参数见表 1，68种农药对照品和杭白菊代表性样品的MRM叠加图分别见图1～2。
图1 68种农药对照品MRM叠加图(200 ng·mL-1)
Fig. 1 MRM chromatogram of reference substances of 68 pesticides residues(200 ng·mL-1)
图2 杭白菊样品的MRM叠加图
Fig. 2 MRM chromatogram of sample of Chrysanthemum morifolium
2.2 溶液配制
2.2.1 对照品储备溶液的制备 取各农药对照品适量，精密称定，加丙酮溶解并稀释至刻度，混匀，分别制成 100～500 μg·mL-1对照品储备溶液。
2.2.2 混合对照品储备溶液的制备 根据各农药对照品在仪器上的实际响应值，精密量取各对照品储备溶液适量，置于100 mL量瓶中，用丙酮稀释至刻度，混匀，制成各农药对照品浓度为0.75～16.98 μg·mL-1的混合对照品储备溶液。
2.2.3 内标溶液的制备 精密量取内标储备溶液(氘代倍硫磷，浓度为 100 μg·mL-1，纯度为99.5%)1.0 mL，置于20 mL量瓶中，用丙酮稀释至刻度，摇匀，制得4.98 μg·mL-1的内标溶液。
2.2.4 供试品溶液的制备 取供试品粉碎成粉末(过三号筛)，取约3 g，精密称定，至50 mL聚苯乙烯具塞离心管中，加入1%冰醋酸溶液15 mL，涡旋使药粉充分浸润，放置 30 min，精密加入乙腈15 mL与内标溶液150 μL，涡旋使混匀，至摇床上剧烈振荡(每分钟 450次)5 min，加入无水硫酸镁与无水乙酸钠的混合粉末(4︰1)7.5 g，立即摇散，再置摇床上剧烈振荡(每分钟 450次)3 min，放置至室温，4 000 r·min-1离心5 min，取上清液9 mL，置已预先装有净化材料的分散固相萃取净化管(无水硫酸镁900 mg，PSA 300 mg，十八烷基键合硅胶300 mg，硅胶300 mg，石墨化炭黑90 mg)中，涡旋使充分混匀，再置摇床上剧烈振荡(每分钟450次)5 min，使净化完全，4 000 r·min-1离心5 min，精密吸取上清液5 mL，至氮吹仪上浓缩至近干，用丙酮溶解并定容至1 mL，涡旋混匀，用微孔滤膜滤过(0.22 μm)，取续滤液，即得。
2.2.5 基质混合对照品溶液的制备 取空白基质样品，粉碎成粉末(过三号筛)，取约3 g，精密称定，至50 mL聚苯乙烯具塞离心管中，加入1%冰醋酸溶液 15 mL，涡旋使药粉充分浸润，放置30 min，精密加入乙腈15 mL，按供试品溶液的制备方法处理至“至氮吹仪上浓缩至近干”，分别精密加入内标溶液 50 μL和混合对照品储备溶液适量，再用丙酮定容至1 mL，制成浓度分别为(以反式氯丹Chlordane-trans的浓度计)5，10，20，50，100，200，300 ng·mL-1的基质混合对照品溶液。
2.3 测定方法
精密吸取供试品溶液和基质混合对照品溶液各1 μL，注入气相色谱-串联质谱仪，按内标校准曲线法计算供试品中68种农药残留量。
2.4 方法学验证
2.4.1 线性关系 精密吸取系列基质混合对照品溶液各1 μL，进样分析，以各农药化合物与内标的浓度比为横坐标(x)，各农药化合物与内标的峰面积比为纵坐标(y)，进行回归分析，结果表明，各农药化合物线性关系良好，相关系数均＞0.993。结果详见表1。
2.4.2 仪器精密度试验 精密吸取浓度为100 ng·mL-1的基质混合对照品溶液1 μL，注入气相色谱-质谱联用仪，连续进样5次，记录各化合物定量离子峰面积，计算各待测化合物与内标峰面积比值的RSD，结果测得各农药化合物RSD在1.0%～12.5%内，表明仪器精密度较好。
表1 68种农药和内标的保留时间、质谱参数、回归方程和相关系数
Tab. 1 The retention time, mass parameters, regression curve and related correl of 68 pesticides and internal standard
中文名 RT/min 定量离子对(CE/eV)定性离子对(CE/eV)线性范围/μg·mL-1 回归方程 相关系数r敌敌畏 6.38 184.9→93.0(10) 109.0→79.0(5) 8.75～525.00 y=0.173 836x-0.001 586 0.995 9四氯硝基苯 11.13 260.9→203.0(10) 214.9→179.0(10) 4.00～240.00 y=0.375 63x+0.000 331 299 8 0.999 6二苯胺 11.50 169.0→168.2(15) 168.0→167.2(15) 26.68～800.33 y=2.707 288x+0.222 775 0.996 7氟乐灵 12.56 305.9→264.0(5) 264.0→160.1(15) 4.00～240.00 y=0.414 146x-0.001 297 0.999 0 α-六六六 13.04 216.9→181.0(5) 180.9→145.0(15) 4.00～240.00 y=0.583 416x-0.000 895 464 8 0.998 8六氯苯 13.40 283.8→213.9(30) 283.8→248.8(15) 4.00～240.00 y=0.959 474x+0.001 058 0.997 6五氯甲氧基苯 13.57 280.0→237.0(22) 280.0→265.0(12) 4.09～245.10 y=1.109 583x-0.002 003 0.997 9氯硝胺 13.85 206.1→176.0(10) 160.1→124.1(10) 80.43～2 412.80 y=0.378 527x-0.008 724 0.998 7 β-六六六 14.38 181.0→145.0(15) 216.7→180.8(8) 4.00～240.00 y=0.691 692x+0.009 463 0.998 5 γ-六六六 14.46 181.0→145.0(17) 216.9→181.0(5) 4.00～240.00 y=1.402 917x+0.001 129 0.998 5五氯硝基苯 14.70 295.0→237.0(18) 237.0→143.0(30) 19.98～1 198.72 y=0.228 517x-0.002 318 0.998 9特丁硫磷 14.80 230.9→129.0(20) 230.9→175.0(10) 4.00～240.00 y=1.355 354x-0.001 042 0.997 7 δ-六六六 15.75 217.0→180.8(8) 181.1→145.1(15) 8.53～511.50 y=0.158 648x+0.002 914 0.997 3七氟菊酯 16.10 177.1→127.1(15) 177.1→87.0(30) 6.50～390.00 y=2.827 438x-0.005 32 0.997 4五氯苯胺 16.66 262.8→192(20) 265.0→230.0(15) 10.17～609.94 y=0.490 648x-0.002 25 0.997 2甲基毒死蜱 17.67 285.9→92.9(20) 286.0→271.0(15) 21.27～1 276.38 y=0.519 297x-0.002 576 0.999 4甲基对硫磷 17.72 262.9→109.0(10) 262.9→79.0(30) 21.23～1 273.92 y=0.342 248x-0.009 619 0.997 4乙烯菌核利 17.75 187.0→124.0(20) 197.9→145.0(15) 21.16～1 269.59 y=0.357 838x-0.000 821 395 5 0.998 1七氯 17.87 271.7→236.9(15) 273.7→238.9(15) 4.25～255.00 y=0.806 635x-0.001 359 0.997 9皮蝇磷 18.41 285.0→270.0(18) 285.0→240.0(30) 4.25～255.00 y=0.996 54x-0.001 911 0.999 4八氯二丙醚 18.43 129.9→94.9(20) 108.9→83.0(10) 4.25～255.00 y=0.442 618x-0.001 728 0.998 3甲基五氯苯硫醚 19.15 296.0→263.0(15) 296.0→281.0(20) 4.50～270.00 y=0.437 537x-0.001 298 0.998 4杀螟硫磷 19.27 277.0→109.0(15) 260.0→125.0(10) 31.80～1 908.20 y=0.246 452x-0.012 474 0.996 7苯氟磺胺 19.53 223.7→123.1(15) 166.8→124.0(12) 8.83～529.55 y=0.388 219x+0.005 707 0.999 1艾氏剂 19.61 262.9→192.9(35) 254.9→220.0(20) 4.25～255.00 y=0.378 375x+0.002 648 0.997 3氘代倍硫磷 20.08 284.0→169.0(15) 284.0→115.0(20) / / /毒死蜱 20.29 313.8→257.8(15) 196.8→169.0(18) 20.07～1 204.03 y=0.811 744x+0.107 077 0.999 2对硫磷 20.35 291.0→109.1(15) 290.9→80.9(25) 9.25～555.00 y=0.239 317x-0.002 858 0.998 8三氯杀螨醇 20.37 250.1→139.1(15) 250.1→111.0(43) 16.92～1015.10 y=0.481 982x-0.005 932 0.999 2氯酞酸二甲酯 20.52 298.9→221.0(25) 331.8→300.9(10) 6.01～360.30 y=1.039 907x-0.002 09 0.998 8三唑酮 20.55 208.0→181.1(5) 208.0→111.0(20) 42.81～2 568.60 y=0.661 318x-0.004 303 0.997 9溴硫磷 21.13 331.0→315.9(20) 124.9→47.0(10) 19.06～1 143.51 y=0.581 123x-0.000 878 585 1 0.999 2仲丁灵 21.23 266.0→220.2(10) 266.0→174.2(20) 31.86～1 911.37 y=0.248 126x-0.014 341 0.997 7顺式环氧七氯 21.78 352.8→262.9(15) 354.8→264.9(15) 19.11～1 146.88 y=0.193 482x+0.000 073 885 16 0.998 7氧化氯丹 21.84 184.9→85.0(30) 386.7→262.7(15) 4.96～297.75 y=0.233 6x+0.000 555 135 5 0.999 2反式环氧七氯 22.01 182.9→154.9(15) 182.9→118.9(25) 8.50～255.00 y=0.150 492x+0.022 397 0.999 6二甲戊乐灵 22.02 252.1→162.1(12) 252.1→190.8(8) 32.08～1 924.65 y=0.316 077x-0.021 514 0.997 5哌草丹 22.51 144.9→112.1(5) 144.9→69.1(15) 7.00～420.00 y=1.364 511x-0.007 444 0.998 0三唑醇 22.85 168.0→70.0(10) 128.0→65.0(25) 42.47～2 548.13 y=0.614 28x-0.000 120 043 0.997 3腐霉利 22.95 282.8→96.0(10) 284.8→96.0(10) 4.25～255.00 y=0.537 953x+0.001 511 0.998 5氟虫腈 22.97 366.8→212.8(25) 350.8→254.8(15) 33.92～2 034.96 y=0.297 526x-0.006 664 0.998 6反式氯丹 22.99 271.7→236.9(15) 372.8→265.8(15) 5.19～311.22 y=0.273 668x+0.000 041 201 82 0.998 8 o,p′-滴滴伊 23.36 246.0→176.2(30) 317.8→248.0(15) 4.25～255.00 y=3.273 062x-0.005 414 0.997 6乙基溴硫磷 23.41 358.7→302.8(15) 241.9→96.9(30) 21.28～1 276.60 y=0.585 698x-0.000 972 786 4 0.999 5 α-硫丹 23.53 194.9→159.0(5) 194.9→125.0(20) 21.44～1 286.35 y=0.052 587x+0.012 678 0.999 6顺式氯丹 23.70 271.9→236.9(15) 372.9→265.9(20) 4.34～260.30 y=0.255 221x-0.000 365 551 1 0.997 4氟节胺 24.08 142.8→107.0(32) 143.0→117.0(20) 4.50～270.00 y=0.663 361x-0.003 744 0.998 1狄氏剂 24.63 263.0→193.0(43) 277.0→206.0(25) 9.00～540.00 y=0.176 706x-0.000 915 472 3 0.997 7 p,p′-滴滴伊 24.76 246.1→176.2(30) 315.8→246.0(15) 4.50～270.00 y=2.615 617x-0.007 595 0.997 0 o,p′-滴滴滴 25.05 235.1→165.1(32) 235.4→199.2(18) 4.25～255.00 y=4.055 715x-0.004 805 0.998 1异狄氏剂 25.45 262.8→193.0(35) 316.7→280.8(5) 9.00～540.00 y=0.247 321x-0.001 082 0.998 2
续表1
中文名 RT/min 定量离子对(CE/eV)定性离子对(CE/eV)线性范围/μg·mL-1 回归方程 相关系数r除草醚 25.65 202.1→139.1(25) 283.1→253.1(12) 18.00～1 080.00 y=0.425 856x-0.013 836 0.999 3 β-硫丹 25.84 206.9→172.0(15) 194.9→158.9(10) 33.89～2 033.18 y=0.0467 99x+0.001 584 0.998 6溴虫腈 25.93 246.9→227.0(15) 327.8→246.8(15) 45.09～2 705.29 y=0.045 237x+0.012 986 0.999 6 p,p′-滴滴滴 26.29 235.0→165.2(20) 234.9→199.1(15) 4.50～270.00 y=5.876 98x+0.000 795 091 4 0.999 5 o,p′-滴滴涕 26.42 235.0→165.2(20) 235.0→199.1(15) 4.50～270.00 y=4.083 657x-0.019 692 0.997 0 p,p′-滴滴涕 27.52 235.0→165.2(20) 235.0→199.2(15) 9.00～270.00 y=1.483 657x-0.026 45 0.993 6溴螨酯 29.03 338.8→182.9(20) 341.0→185.0(30) 4.50～270.00 y=1.274 161x-0.001 356 0.998 6联苯菊酯 29.20 181.2→165.2(25) 181.0→166.0(20) 9.00～270.00 y=6.613 729x+0.108 43 0.997 4甲氧滴滴涕 29.22 227.0→141.1(40) 227.0→169.1(25) 7.50～225.00 y=1.121 928x+0.023 074 0.993 6甲氰菊酯 29.33 207.9→181.0(5) 265.0→210.0(8) 22.43～1 345.51 y=0.362 952x-0.001 225 0.999 3苯醚菊酯 29.77，29.91 183.0→168.0(10) 183.0→153.0(12) 24.91～1 494.33 y=0.633 333x+0.352 420 0.997 3氯氟氰菊酯 30.62 208.0→181.0(5) 181.2→152.1(25) 13.73～824.07 y=0.614 428x-0.003 793 0.996 3氯菊酯 31.59，31.75 183.1→153.1(15) 183.1→165.1(10) 49.45～1 483.54 y=1.093 781x+0.038 795 0.998 8氟氯氰菊酯 32.42，32.55，32.67，32.73 226.0→206.0(12) 162.9→127.0(5) 45.01～2 700.40 y=0.527 239x-0.065 769 0.996 0氯氰菊酯 32.89，33.04，33.17，33.24 163.0→127.0(5) 181.0→127.0(30) 106.95～3 208.48 y=0.488 842x-0.032 379 0.994 5喹禾灵 33.16 163.0→100.0(20) 163.0→136.0(10) 45.24～2 714.55 y=0.349 349x-0.011 625 0.997 5氟氰戊菊酯 33.25，33.55 156.9→107.1(15) 198.9→157.0(10) 23.91～1 434.60 y=1.785 761x-0.066 002 0.996 7氰戊菊酯 34.45，34.85 167.0→125.1(5) 181.0→152.1(20) 22.54～1 352.58 y=0.612 765x-0.045 187 0.995 6
2.4.3 重复性试验和加样回收率试验 取供试品12份，分别进行低、中、高(20，100，200 μg·kg-1)3个不同添加水平的加样回收率试验，其中中水平进行 6次平行试验，同时用于重复性试验测定，低、高2水平分别进行 3次平行试验，计算各样品加样回收率及其 RSD。结果显示，大部分农药化合物加样回收率均在70.0%～120.0%之间，RSD为0.4%～13.9%，其中有5种农药化合物的加样回收率＜70.0%或＞120.0%，分别为六氯苯、甲基五氯苯硫醚、苯氟磺胺、p, p′-滴滴伊和氯氟氰菊酯，RSD为1.8%～7.8%，结果见表2。
2.4.4 检出限(LOD)与定量限(LOQ) 取低浓度加样样品进行分析，测定信噪比，取信噪比约为3的溶液浓度作为方法中农药的 LOD，为 0.2～25.6 μg·kg-1，取信噪比约为 10的溶液浓度作为方法中农药的 LOQ，为 0.8～85.5 μg·kg-1，结果见表2。采用加样回收的方法分别测定68种农药在定量限附近的回收率，为72.0%～113.1%，RSD为0.4%～10.6%。
表2 68种农药的回收率、LOD和LOQ
Tab. 2 The recovery rate, LOD and LOQ of 68 pesticides
中文名 低水平(n=3) 中水平(n=6) 高水平(n=3) LOD/μg·kg-1回收率/% RSD/% 回收率/% RSD/% 回收率/% RSD/%LOQ/μg·kg-1敌敌畏 95.9 6.1 97.2 6.7 87.4 5.4 1.5 5.2四氯硝基苯 93.8 9.3 85.5 10.2 85.8 4.9 0.8 2.7二苯胺 97.6 4.2 93.9 5.6 90.8 3.5 2.4 8.1氟乐灵 119.3 4.2 110.0 7.7 109.7 3.8 0.7 2.5 α-六六六 117.4 2.9 111.9 10.2 107.1 4.1 1.1 3.8六氯苯 74.7 9.9 63.8 7.0 69.1 4.0 1.2 4.1五氯甲氧基苯 90.4 11.7 79.5 11.1 86.0 5.2 1.5 5.0氯硝胺 77.5 3.6 82.2 4.9 77.6 3.5 6.3 24.9 β-六六六 92.3 4.8 98.1 7.1 84.3 2.8 1.3 4.4 γ-六六六 105.8 3.0 101.0 7.1 100.3 4.5 1.3 4.4五氯硝基苯 92.2 2.9 88.9 9.9 91.6 5.4 3.9 13.2特丁硫磷 97.5 3.1 101.8 11.0 99.5 8.8 0.7 2.2 δ-六六六 94.4 2.7 105.8 2.8 106.2 4.8 9.7 32.2七氟菊酯 98.9 7.7 95.6 13.0 97.1 10.5 0.9 2.9五氯苯胺 74.0 13.9 72.5 12.5 70.1 4.6 3.4 7.2甲基毒死蜱 118.5 3.5 110.4 10.4 108.2 8.2 3.2 10.6甲基对硫磷 117.5 5.3 110.3 12.4 109.9 11.9 12.3 23.5
续表2
乙烯菌核利 107.1 6.1 103.2 11.5 101.0 4.6 4.2 10.9七氯 91.1 3.5 91.7 12.0 89.8 7.7 0.4 1.2皮蝇磷 107.5 4.4 104.9 12.1 101.5 7.7 1.5 3.1八氯二丙醚 115.3 10.1 114.2 4.5 107.4 3.5 1.8 4.7甲基五氯苯硫醚 65.1 4.4 64.4 6.3 66.3 5.2 1.6 1.6杀螟硫磷 118.9 7.1 115.1 9.4 118.7 9.5 7.7 25.7苯氟磺胺 124.8 1.8 118.2 2.6 124.6 4.4 5.6 13.4艾氏剂 73.5 3.2 70.4 6.3 73.3 3.7 2.4 5.4毒死蜱 114.6 4.2 106.5 5.3 109.1 5.9 4.7 15.5对硫磷 117.7 4.8 115.3 4.3 119.5 5.0 5.6 18.7三氯杀螨醇 78.1 1.6 70.2 2.9 70.1 4.3 8.8 22.5氯酞酸二甲酯 106.8 0.6 103.4 5.5 104.4 2.9 0.8 2.8三唑酮 110.6 4.9 104.5 5.1 108.1 3.4 3.3 11.1溴硫磷 117.6 5.2 108.2 8.9 101.5 8.7 2.6 8.5仲丁灵 107.8 7.6 102.0 6.5 104.0 7.1 6.2 20.7顺式环氧七氯 105.2 11.3 95.4 9.2 97.4 6.7 2.1 7.1氧化氯丹 95.7 7.7 84.8 10.7 87.5 7.5 2.2 7.2反式环氧七氯 103.4 7.7 94.3 5.6 91.7 1.3 2.1 7二甲戊乐灵 104.0 8.3 93.0 9.1 98.7 6.8 7.2 24哌草丹 109.5 5.9 97.4 10.1 96.9 7.5 0.9 3.0三唑醇 106.7 7.4 100.0 8.5 105.1 5.2 17.1 38.5腐霉利 117.3 11.4 97.4 11.8 95.7 10.6 1.5 2.8氟虫腈 117.7 9.2 96.7 10.9 102.3 6.8 1.5 5.1反式氯丹 92.9 7.9 80.7 10.0 82.7 7.7 0.9 3.1 o,p′-滴滴伊 81.8 9.8 75.6 10.8 76.6 6.1 0.4 1.4乙基溴硫磷 98.9 6.6 86.5 8.7 90.2 7.9 1.0 3.5 α-硫丹 110.2 7.2 105.3 6.2 101.1 1.3 25.6 85.5顺式氯丹 89.4 12.9 79.8 10.7 80.5 5.8 0.9 2.9氟节胺 119.1 4.8 111.1 8.3 109.5 8.4 1.3 4.2狄氏剂 96.6 3.5 92.8 9.6 94.6 7.2 5.4 8.4 p,p′-滴滴伊 65.9 3.7 66.5 7.8 66.4 4.0 0.4 1.3 o,p′-滴滴滴 88.7 4.4 84.8 8.3 85.4 7.2 0.4 1.4异狄氏剂 99.6 4.8 92.8 8.3 94.8 5.9 3.4 14.3除草醚 84.0 3.5 83.3 4.3 78.3 3.0 8.9 15.6 β-硫丹 108.7 2.9 103.0 6.2 103.6 5.2 12.4 26.9溴虫腈 104.0 4.9 107.2 4.6 104.3 3.0 6.9 23.1 p,p′-滴滴滴 93.7 9.7 87.8 7.5 86.1 8.8 1.1 3.7 o,p′-滴滴涕 93.2 2.3 92.1 9.6 108.0 2.4 0.9 2.9 p,p′-滴滴涕 118.7 11.4 99.7 5.4 98.0 1.1 6.3 3.0溴螨酯 108.5 10.7 99.1 6.3 94.9 6.4 0.2 0.8联苯菊酯 77.9 6.3 84.0 3.8 78.6 6.2 1.1 3.8甲氧滴滴涕 115.5 8.3 110.3 1.6 107.5 1.9 1.9 6.3甲氰菊酯 112.7 9.1 104.1 4.8 97.6 5.6 4.4 14.6苯醚菊酯 90.1 5.1 87.8 5.0 90.2 2.7 4.9 16.2氯氟氰菊酯 124.6 5.3 117.6 8.0 112.9 4.8 1.5 5.0氯菊酯 95.4 3.1 86.2 3.9 86.0 2.9 6.9 22.8氟氯氰菊酯 117.7 2.1 95.9 5.1 89.5 3.6 17.9 33.7氯氰菊酯 109.5 0.4 98.8 7.4 89.3 2.3 14.4 48.2喹禾灵 99.8 8.0 94.5 2.0 90.5 3.5 6.2 20.8氟氰戊菊酯 90.4 6.9 82.4 3.1 75.1 2.5 7.6 25.2氰戊菊酯 115.6 3.7 100.9 6.9 95.9 2.7 11.9 20.4
2.5 样品测定
按照上述方法对 40批菊花进行农药残留测定，结果所监测的68种农药中共检出5种，分别为毒死蜱、溴虫腈、甲氧滴滴涕、苯醚菊酯和氯菊酯。毒死蜱检出范围为0.02～0.51 mg·kg-1，检出率为50.0%。溴虫腈检出范围为0.05～0.08 mg·kg-1，检出率为 10.0%。甲氧滴滴涕检出范围为 0.01～0.02 mg·kg-1，检出率为85.0%。苯醚菊酯检出范围为 0.03～0.07 mg·kg-1，检出率为 45.0%。氯菊酯检出范围为0.01～0.02 mg·kg-1，检出率为12.5%。经查阅日本肯定列表、欧洲药典、欧盟农药残留限量标准及GB 2763-2016《食品中农药最大残留限量》，拟定毒死蜱、溴虫腈、甲氧滴滴涕、苯醚菊酯和氯菊酯 5种农药的参考农药最高残留限量值分别为 1，10，0.05，0.05，1 mg·kg-1，对比发现 3批样品存在苯醚菊酯残留超标的现象。总体来看，40批样品中农药检出品种不多，除个别批次外，农药检出量也大部分在限量范围内，结合实际调研了解，随着人们对食品药品安全意识的提高，在中药材种植过程中，种植基地已渐渐趋向于选择低毒低残留农药，以兼顾中药材品质、产量及食用安全。
3 讨论
试验对 7种不同提取溶剂进行了比较，结果发现石油醚(60～90 ℃)、正己烷、环己烷提取效果欠佳，乙腈、丙酮、乙酸乙酯、环己烷∶乙酸乙酯(1∶1)4种提取溶剂对各农药提取效果相对较好。但丙酮、乙酸乙酯、环己烷∶乙酸乙酯(1∶1)极性较小，对色素等杂质化合物也有较好的溶解力，提取样品中农药化合物的同时，也易造成其他杂质化合物的共萃取，对测定结果干扰严重，增加仪器污染负担，而且这 3种溶剂沸点较低，易挥发，容易引起提取溶剂体积的变化，使得最终测定结果的偏差较大。因此，最终选择乙腈作为提取溶剂。
试验对净化填料石墨化炭黑的使用量做了比较，结果发现石墨化炭黑用量分别为90，150，200，250 mg时，提取溶液颜色及测定结果均无明显差异，最终选择石墨化炭黑的用量为90 mg。
本研究应用高灵敏的气相色谱-三重四极杆质谱联用仪，结合能够实现样品快速提取净化的QuEChERS前处理技术，建立了同时测定杭白菊中68种农药残留的分析方法。该方法不仅简单、快速、高效，而且选择性好，灵敏度高，通过基体匹配校准法与同位素内标法相结合，有效降低了基质效应对测定的干扰，可用于杭白菊中农药多残留的筛查和痕量分析。
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