杨巧丽，刘燕，史玉柱，王雪，司丽君，黄华*(新疆维吾尔自治区药物研究所，乌鲁木齐 830004)
摘要：目的 探讨毛菊苣水提物的急性毒性，并通过D-氨基半乳糖盐酸盐(D-GaIN)、卡介苗联合脂多糖(BCG+LPS)和异硫氰酸-1-萘酯(ANIT)致小鼠肝损伤实验研究探讨毛菊苣水提物的保肝作用。方法急性毒性试验：将小鼠随机分为给药组和空白对照组，并观察记录14 d内小鼠死亡情况、体质量和摄食量等，14 d后处死并做大体解剖，观察其各主要脏器是否异常。保肝实验：将小鼠分成空白对照组、模型组、阳性对照组(联苯双酯组/护肝片组)及毛菊苣水提物0.13 g·kg-1和 0.26 g·kg-1剂量组，采用D-GaIN建立化学性肝损伤模型，BCG+LPS建立免疫性肝损伤模型，ANIT建立小鼠黄疸性肝炎模型，经眼球采血，测定血清中ALT、AST、总胆红素(total bilirubin，TBIL)和直接胆红素(direct bilirubin，DBIL)水平，同时测定肝脏指数，并取肝脏做常规HE切片观察。结果小鼠单次最大给药量为150 g(生药)·kg-1未出现死亡及其他急性毒性反应。保肝实验：在D-GaIN致小鼠化学性肝损伤模型中，毛菌苣水提物0.26 g·kg-1剂量组能显著抑制D-GaIN所致的血清ALT、AST和TBIL活性升高(P＜0.05或P＜0.01)；在免疫性肝损伤模型中毛菊苣水提物各剂量组均可显著抑制BCG+LPS所致的小鼠血清ALT、AST活性升高(P＜0.01)，但对血清中TBIL的含量未见明显改变。在黄疸性肝炎模型中，毛菊苣水提物0.26 g·kg-1剂量组可显著抑制ANIT所致的小鼠血清ALT、AST、TBIL和DBIL活性升高(P＜0.01)。此外毛菊苣水提物0.13 g·kg-1剂量组对小鼠血清中TBIL和DBIL的含量也有显著的抑制作用(P＜0.01)。肝脏病理切片结果显示毛菌苣水提物各剂量组对本实验中的3种肝损伤均有明显改善作用。结论毛菊苣水提物以最大剂量150 g(生药)·kg-1给药对小鼠未见明显急性毒性反应，对实验性肝损伤具有较好的保护作用。
关键词：毛菊苣水提取物；D-氨基半乳糖盐酸盐；卡介苗联合脂多糖；肝损伤；急性毒性
菊苣为菊科植物毛菊苣(Cichorium glandulosum Boiss.et Huet)或菊苣(Cichorium intybus L.)的干燥地上部分或根，为中国药典2015年版[1]收载品种维吾尔医习用药材，功能主治为清肝利胆，健胃消食，利尿消肿，用于湿热黄疸等。据维吾尔族多部医药典籍记载维吾尔医习用菊苣水提取物治疗肝炎、胆囊炎等疾病，其中单方制剂的代表药物有清热卡森颗粒，复方制剂的代表药物有炎消迪娜儿糖浆、护肝布祖热颗粒及复方木尼孜其颗粒等[2]。但查阅菊苣的相关文献[3-8]发现，该药材的现代药理学研究多集中于菊苣有机溶剂提取物保肝、抗菌、降血糖、调血脂和抗高尿酸血症等作用上，关于菊苣水提取物的毒性和保肝作用的系统研究却鲜有报道，因此本课题针对毛菊苣水提物进行了急性毒性的初步研究，并采用了3种实验性小鼠肝损伤模型，观察其保肝降酶作用，以期为毛菊苣水提取物的临床应用提供一定的实验依据。
1.1 动物和药材试剂
昆明种SPF级小鼠，♀♂各半，体质量18～22 g，由新疆实验动物研究中心提供，实验动物质量合格证号：No.65000200000380，No.65000200000392，No.65000200000425；实验动物设施使用证明编号：No.00000502，No.00000504，No.00000763；实验动物生产许可证号：SCXK(新)2011-0001。
毛菊苣地上部分样品采自新疆吉木萨尔县泉子镇十八户村，药材经新疆药物研究所维药室何江副研究员鉴定。联苯双酯滴丸(浙江万邦药业股份有限公司，批号：A02130409，规格：1.5 mg)；护肝片(黑龙江葵花药业股份有限公司，批号：201405101，规格：每片0.35 g)；D-氨基半乳糖(D-GaIN，美国Sigma公司，批号：101596512)；氢氧化钠(上海德诺化学试剂有限公司，批号：20100422)；ALT、AST试剂盒均购自四川迈克生物科技股份有限公司(批号分别为0715031，0715021)；TBIL、DBIL试剂盒均购自德赛诊断系统(上海)有限公司(批号分别为07255，07261)；卡介苗(BCG，中国生物制品药品检定所，批号：2013-1)；脂多糖(LPS，美国Sigma公司，批号：L-2880)；异硫氰酸-1-萘酯脂多糖(ANIT，成都贝斯特试剂有限公司，批号：T1207441)。
1.2 仪器
YP型电子天平(上海菁海仪器有限公司)；BS200S型电子天平(北京赛多利斯天平有限公司)；80-2离心沉淀器(江苏省金坛市医疗仪器厂)；日立7600-110型全自动生化分析仪(日本株式会社日立高新技术)。
2.1 毛菊苣水提取物的制备及给药剂量设定
取毛菊苣地上部分以10倍量水回流提取， 每次1.5 h，连续提取3次后合并提取液，浓缩、真空干燥得毛菊苣水提取物，其中提取物得率为10.7%。参考中国药典2015年版一部记载的临床成人每天9～18 g(生药)的服用量，即临床成人每日用量为0.1～0.3 g·kg-1。肝损伤实验分别取9 g和18 g水提取物作为本实验的低、高剂量，并根据毛菊苣水提取物的出膏率及人和动物体表面积换算表折算成小鼠每日口服剂量为0.13，0.26 g·kg-1；护肝片和联苯双酯按人和动物体表面积换算表折算成小鼠每日口服剂量分别为0.5，0.15 g·kg-1。
2.2 小鼠急性毒性试验
2.2.1 预实验 选取10只昆明小鼠，♀♂各半，体质量18～22 g，禁食12 h，不禁水。毛菊苣水提取物制成最大给药浓度(37.5%)药液，以0.04 mL·g-1灌胃给药1次，观察24 h，如未见死亡，且精神与活动状态亦无异常可进入正式实验。
2.2.2 最大给药量的测定 选取健康昆明小鼠20只，♀♂各半，体质量18～22 g，随机分为空白对照组(给予等量的蒸馏水)、毛菊苣水提取物组，每组10只。毛菊苣水提取物以蒸馏水配成最大给药浓度(37.5%)的溶液，按0.04 mL·g-1灌胃给药，每天1次。观察记录给药后14 d内动物全身状况及局部反应，第14天各组动物称重后处死，作大体解剖检查，并对肉眼可见异常的器官进行组织病理学检查。
2.3 保肝作用实验
2.3.1 对D-GaIN致小鼠急性肝损伤的影响[9]取昆明小鼠60只，♀♂各半，体质量19～23 g，随机分为空白对照组、模型组、联苯双酯组(0.15 g·kg-1)、毛菊苣水提取物低、高剂量组(0.13，0.26 g·kg-1)，每组12只。各给药组均按设定剂量灌胃给药，空白对照组和模型组给予等体积0.5%羧甲基纤维素钠，每天1次，连续3 d。于第3天给药后1.5 h，除空白对照组外，其余各组小鼠均腹腔注射8%D-GaIN生理盐水溶液800 mg·kg-1，空白对照组腹腔注射等体积生理盐水，20 h后摘眼球取血并分离血清，采血前禁食12 h，不禁水，测定血清中ALT、AST、TBIL水平，同时解剖取肝脏并称重，计算肝指数，并取肝右叶相同部位组织固定于10 %甲醛溶液，进行病理学检查。肝指数=肝脏质量/体质量×100。
将切片按病理损伤程度分成4级：“-”，未见明显病理改变；“+”，偶见散在单个肝细胞坏死，或伴汇管区纤维组织增生，嗜酸性小体形成；“++”，可见少量肝细胞坏死灶(3个及以下)，或伴汇管区纤维组织增生，嗜酸性小体形成；“+++”，可见大量散在、灶状肝细胞坏死灶(3个以上)，或伴汇管区纤维组织增生，嗜酸性小体形成。
2.3.2 对BCG+LPS致小鼠免疫性肝损伤的影响[10]取昆明种小鼠60只，体质量18～22 g，♀♂兼用，按“2.3.1”项下方法分组。各给药组均按设定剂量灌胃给药，空白对照组和模型组给予等体积0.5%羧甲基纤维素钠，各组每天1次，连续给药10 d。除空白对照组外，其余各组小鼠在首次给药前均尾静脉注射10 mg·mL-1的BCG生理盐水溶液0.2 mL，空白对照组尾静脉注射等体积生理盐水。于给药第10天，除空白对照组外，其余各组小鼠均尾静脉注射LPS生理盐水溶液5 µg，空白对照组尾静脉注射等体积生理盐水，16 h后，摘眼球取血并分离血清，采血前禁食12 h，不禁水，测定血清ALT、AST、TBIL水平；解剖取肝脏并称重，计算肝指数。并取肝右叶相同部位组织固定于10%甲醛溶液，按“2.3.1”项下方法进行病理学检查。
2.3.3 对ANIT致小鼠肝损伤的影响 取昆明种小鼠72只，♀♂各半，体质量22～25 g，按“2.3.1”项下方法分组及给药，护肝片和联苯双酯(0.5 g·kg-1)为阳性对照药。于第2天给药后1.5 h，除空白对照组外，其余各组小鼠均灌胃给药ANIT大豆油溶液100 mg·kg-1。空白对照组给予等体积大豆油。48 h后，各组小鼠摘眼球取血并分离血清，采血前禁食12 h，不禁水，测定血清ALT、AST、TBIL、DBIL水平，同时解剖取肝脏并称重，计算肝指数；取肝右叶相同部位组织固定于10 %甲醛溶液，按“2.3.1”项下方法进行病理学检查。
2.4 统计学处理
运用SPSS 13.0统计软件进行处理，计量资料比较采用t检验，实验结果以x±s表示，P＜0.05为差异具有统计学意义。肝损伤实验中肝脏病理切片统计结果采用Wilcoxon秩和检验，P＜0.05为差异具有统计学意义。
3.1 小鼠急性毒性试验结果
试验观察期内对照组和给药组动物均未出现死亡；外观体征、行为活动及饮食等均未见异常；实验结束时给药组动物体质量为(36.7±3.9)g，对照组体质量为(38.4±5.5)g，且给药组体质量与对照组比较无显著性差异，大体解剖检查给药组与对照组组织脏器比较亦未发现有明显异常。本品以最大给药浓度(37.5%)、最大给药容积(0.04 mL·g-1)给小鼠1 d灌胃1次，最大给药量为15 g·kg-1(按生药计为150 g·kg-1)，为70 kg成人18 g(生药)每日每千克体质量用量的500倍，连续观察14 d内未出现死亡及其他急性毒性反应。提示本提取物在此剂量下无明显毒性，用药安全。
3.2 保肝作用实验
3.2.1 毛菊苣水提取物对D-GaIN致小鼠急性肝损伤的影响 与空白对照组比较，模型组小鼠血清ALT、AST水平均显著升高(P＜0.01)，表明造模成功。与模型组比较，毛菊苣水提取物0.13 g·kg-1剂量组可显著降低模型小鼠血清ALT水平(P＜0.05)，0.26 g·kg-1剂量组可显著降低模型小鼠血清ALT、AST和TBIL的水平(P＜0.01或P＜0.05)。此外，模型组肝脏系数显著升高，但各给药组对升高的肝脏系数未见明显改变，结果见表1。
病理检查结果显示，空白对照组未见明显病理改变。模型组小鼠肝细胞均出现病变，主要以肝细胞坏死为主，可见单个/少量肝细胞坏死灶，嗜酸性小体形成。偶见大量点状或灶状肝细胞坏死灶，灶内大量炎细胞浸润。与模型组比较，各给药组均表现出具有减轻D-GaIN致急性肝损伤小鼠肝脏组织学病变程度的作用。其中联苯双酯组病变程度明显减轻，表现为均未见明显病理改变；毛苣菊水提取物表现为低剂量组偶见肝细胞点状坏死，高剂量组效果较明显，表现为均未见明显病理改变，结果见表2和图1(HE染色，200×)。统计结果显示，与模型组比较，联苯双酯和毛菊苣水提取物各剂量组对D-GaIN所致小鼠的病理改变有明显的改善作用(P＜0.01)。样本损失原因：个别样本血清量不足，或数据离散性大，在x±4s范围外舍弃。
表1 毛菊苣水提取物对D-GaIN致肝损伤小鼠血清ALT、AST、TBIL及肝指数的影响(x±s)
Tab. 1 Effect of Cichorium glandulosum aqueous extracts on the levels of serum ALT, AST, TBIL and liver index in liver injury mice induced by D-GaIN(x±s)
注：与空白对照组比较，1)P＜0.01；与模型组比较，2)P＜0.05，3)P＜0.01。
Note： Compared with normal group,1)P ＜0.01; compared with model group,2)P＜0.05,3)P＜0.01.
表2 毛菊苣水提取物对D-GaIN致肝损伤小鼠肝脏病理变化的影响
Tab. 2 The effect of Cichorium glandulosum aqueous extracts on liver pathologyic in liver-injury mice induced by D-GaIN
注：与空白对照组比较，1)P＜0.01；与模型组比较，2)P＜0.01。
Note： Compared with normal group,1)P＜0.01; compared with model group,2)P＜0.01.
3.2.2 毛菊苣水提取物对BCG+LPS致小鼠免疫性肝损伤的影响 与空白对照组比较，模型组小鼠血清ALT、AST、TBIL水平和肝脏系数均显著升高(P＜0.05或P＜0.01)，表明造模成功。与模型组比较，毛菊苣水提取物各剂量组均可显著降低模型小鼠血清AST和ALT水平(P＜0.01)。但各给药组对升高的TBIL和肝脏系数未见明显改变，结果见表3。
病理检查结果显示，空白对照组未见明显病理改变，模型组小鼠肝细胞均出现病变，主要以肝细胞坏死为主，可见少量或大量点状肝细胞坏死，嗜酸性小体形成，部分灶内大量炎细胞浸润。与模型组比较，联苯双酯组病变程度有所减轻，表现为偶见散在单个肝细胞坏死，或可见少量肝细胞坏死灶或伴汇管区纤维，嗜酸性小体形成；毛菊苣水提取物各剂量组对BCG+LPS所致受损肝细胞均有一定减轻作用，低剂量组呈现中度损伤，部分肝细胞可见点状坏死、灶状坏死；高剂量组小鼠肝细胞轻度损伤，部分肝细胞散在点状坏死，个别可见灶状坏死。表4统计结果显示，与模型组比较，毛菊苣水提取物各剂量组和联苯双酯对小鼠D-GaIN所致的病理改变均有明显的改善作用(P＜0.05)，且毛菊苣水提取物高剂量组对受损肝脏病理改变的改善作用优于联苯双酯组(P＜0.05)。病理图片见图2(HE染色，200×)。样本损失原因：个别样本血清量不足，或数据离散性大，在x±4s范围外舍弃。
图1 毛菊苣水提取物对D-GaIN致小鼠急性肝损伤实验肝脏组织的影响(HE，200×)
A-空白对照组；B-模型组；C-联苯双酯组；D-毛菊苣水提取物低剂量组；E-毛菊苣水提取物高剂量组。
Fig. 1 Effect of Cichorium glandulosum aqueous extracts on liver pathology in induced by D-GaIN liver-injuryed mice(HE, 200×)
A-normal group; B-model group; C-Hugan tablets group; D-low dose group of Cichorium glandulosum aqueous extracts; E-high dose group of Cichorium glandulosum aqueous extracts.
表3 毛菊苣水提取物对BCG+LPS致肝损伤小鼠血清ALT、AST、TBIL及肝指数的影响(x±s)
Tab. 3 Effect of Cichorium glandulosum aqueous extracts on serum ALT, AST, TBIL and liver index in liver injury mice induced by BCG+LPS(x±s)
注：与空白对照组比较，1)P＜0.01，2)P＜0.01；与模型组比较，3)P＜0.05，4)P＜0.01。
Note： Compared with normal group,1)P ＜0.01,2)P＜0.01; compared with model group,3)P＜0.05,4)P＜0.01.
表4 毛菊苣水提取物对BCG+LPS致肝损伤小鼠肝脏病理变化的影响
Tab. 4 The effect of Cichorium glandulosum aqueous extracts on liver pathologyic in liver-injury mice induced by BCG+LPS
注：与空白对照组比较，1)P＜0.01，与模型组比较，2)P＜0.05；与联苯双酯组比较，3)P＜0.05。
Note： Compared with normal group,1)P＜0.01; compared with model group,2)P＜0.05; compared with bifendate group,3)P＜0.05.
3.2.3 毛菊苣水提取物对ANIT致小鼠肝损伤的影响 血清转氨酶及肝脏系数结果见表5，与空白对照组比较，模型组小鼠血清ALT、AST、TBIL、DBIL水平均显著升高(P＜0.01)，表明造模成功。与模型组比较，毛菊苣水提取物 0.26 g·kg-1剂量组可显著降低模型小鼠血清AST、ALT、TBIL、DBIL水平(P＜0.01)。此外，与对照组比较，模型组肝指数显著升高(P＜0.01)，且毛菊苣水提物给药组对升高的肝指数有明显改善作用。
病理检查结果显示，空白对照组未见明显病理改变。模型组小鼠肝细胞均出现病变，主要表现为肝细胞坏死为主，偶见或可见点状肝细胞坏死，嗜酸性小体形成。与模型组比较，护肝片组病变程度较减轻，表现为偶见点状肝细胞坏死/可见少量肝细胞坏死灶，嗜酸性小体形成；毛菊苣水提取物各剂量组均对ANIT所致受损肝细胞有一定减轻作用，0.13 g·kg-1剂量组呈现中度损伤，表现为2例(2/7例)肝细胞未见明显病理性改变；偶见点状肝细胞坏死/可见少量肝细胞坏死灶，嗜酸性小体形成；个别可见大量点状或灶状肝细胞坏死灶，灶内大量炎细胞浸润。0.26 g·kg-1剂量组小鼠肝细胞呈现轻度损伤，部分(4/8例)小鼠肝细胞未见明显病理改变，部分小鼠肝细胞轻度损伤，表现为偶见点状肝细胞坏死/可见少量肝细胞坏死灶，嗜酸性小体形成结果见表6，病理图片见图3(HE染色，200×)。样本损失原因：个别样本血清量不足，或数据离散性大，在x±4s范围外舍弃。
图2 毛菊苣水提取物对BCG + LPS致小鼠急性肝损伤实验肝脏组织的影响(HE，200×)
A-空白对照组；B-模型组；C-联苯双酯组；D-毛菊苣水提取物低剂量组；E-毛菊苣水提取物高剂量组。
Fig. 2 Effect of Cichorium glandulosum aqueous extracts on liver pathology in induced by BCG+LPS liver-injuryed mice(HE, 200×)
A-normal group; B-model group; C-Hugan tablets group; D-low dose group of Cichorium glandulosum aqueous extracts; E-high dose group of Cichorium glandulosum aqueous extracts.
表5 毛菊苣水提取物对ANIT致肝损伤小鼠血清ALT、AST、TBIL、DBIL及肝指数的影响(x±s)
Tab. 5 Effect of Cichorium glandulosum aqueous extracts on serum ALT, AST, TBIL and liver index in liver injury mice induced by ANIT(x±s)
注：与空白对照组比较，1)P＜0.01；与模型组比较，2)P＜0.05，3)P＜0.01；与护肝片组比较，4)P＜0.05，5)P＜0.01。
Note： compared with normal group,1)P＜0.01; compared with model group,2)P＜0.05,3)P＜0.01; compared with Hugan tablets group,4)P＜0.05,5)P＜0.01.
图3 毛菊苣水提取物对ANIT致小鼠肝损伤实验肝脏组织的影响(HE，200×)
A-空白对照组；B-模型组；C-联苯双酯组；D-毛菊苣水提取物低剂量组；E-毛菊苣水提取物高剂量组。
Fig. 3 Effect of Cichorium glandulosum aqueous extracts on liver pathology in induced by ANIT liver-injuryed mice(HE, 200×)
Note： A-normal group; B-model group; C-Hugan tablets group; D-low dose group of Cichorium glandulosum aqueous extracts; E-high dose group of Cichorium glandulosum aqueous extracts.
表6 毛菊苣水提取物对ANIT致肝损伤小鼠肝脏病理变化的影响
Tab. 6 Effect of Cichorium glandulosum aqueous extracts on liver pathologyic in ANIT induced liver-injury mice
注：与空白对照组比较，1)P＜0.01。
Note： Compared with normal group,1)P＜0.01.
维吾尔医习用毛菊苣水提取物可用于清肝利胆、湿热黄疸等，本品虽已应用多年但未见其不良反应和较系统保肝作用的实验研究报道，故本课题依据2013年《药物单次给药毒性指导原则(征求意见稿)》设计了其对小鼠的单次给药毒性实验。实验结果表明：本品以最大给药浓度(37.5%)、最大给药容积(0.04 mL·g-1)给予昆明小鼠1日灌胃1次，最大给药量为15 g·kg-1(按生药计为150 g·kg-1)，为70 kg成人18 g(生药)每日每千克体质量用量的500倍，14 d内未出现死亡及其他急性毒性反应。提示本提取物在此剂量下无明显毒性，用药安全。
此外课题组采用了目前常用的D-GaIN肝损伤模型、BCG+LPS免疫性肝损伤模型和ANIT致小鼠黄疸型肝炎模型，观察了毛苣菊水提取物的保肝、退黄疸作用。
其中，D-GaIN通过产生大量自由基引起脂质过氧化造成肝细胞损伤，与临床上病毒性肝炎的肝脏病理变化相似[11]。在本实验中，阳性对照药选用联苯双酯，结果显示：与模型组比较，毛菊苣水提取物低剂量组可显著降低模型小鼠血清ALT水平(P＜0.05)，高剂量组和联苯双酯组均可显著降低模型小鼠血清中ALT、AST和TBIL的水平(P＜0.05或P＜0.01)。病理组织检查方面，毛菊苣水提取物各剂量组和联苯双酯均具有减轻D-GaIN致急性肝损伤小鼠肝脏组织学病变程度的作用。且毛菊苣水提取物高剂量和联苯双酯在保护肝脏病理组织损伤方面的作用相当。
BCG+LPS免疫性肝损伤模型中现代理论推测其损伤机制为单核细胞或巨噬细胞在致炎因子的作用下，向肝脏积聚并致敏。致敏的巨噬细胞在接触LPS后，会释放一些毒性介质如自由基、TNF-α、IL-1等，造成肝细胞的损伤[12]。在实验中，联苯双酯为阳性对照药，结果显示：与模型组比较，联苯双酯和毛菊苣水提取物各剂量组均可显著降低模型小鼠血液中ALT和AST的水平(P＜0.01或P＜0.05)。病理组织检查方面，各给药组均表现出具有减轻BCG+LPS致急性肝损伤小鼠肝脏组织学病变程度的作用。且毛菊苣水提取物高剂量在保护肝脏病理组织损伤方面的作用优于联苯双酯。
ANIT是一种间接肝毒剂，它主要损伤肝内胆管上皮细胞，引起毛细血管增生及小叶间胆管周围产生炎症，从而造成胆管阻塞，形成明显的胆汁淤积，并伴以点状坏死为主的肝实质细胞损害，产生胆汁淤积性黄疸，出现高胆红素血症和胆汁分泌减少[13]。本实验研究发现，联苯双酯对该模型并没有降酶作用，相反小鼠血清中AST、TBIL和DBIL的含量略有升高(结果见表5)，本实验观察到的现象与2015年肖小华报道[14]基本一致，由此可确证联苯双酯不宜作为该模型的阳性对照药。同时本实验设定的另一阳性对照药护肝片组对模型动物血清中明显升高的ALT和胆红素均有显著的抑制作用(P＜0.05)。与护肝片组比较，毛菊苣水提取物高剂量组小鼠血清中转氨酶和胆红素水平均明显降低(P＜0.05或P＜0.01)。结果提示毛苣菊水提取物对ANIT所致小鼠急性肝损伤有显著的保肝降酶退黄作用，且作用优于护肝片组。
综上，毛菊苣水提取物对小鼠D-GaIN肝损伤模型、BCG+LPS免疫性肝损伤模型和ANIT黄疸型肝炎模型小鼠血清中的转氨酶、胆红素含量和肝脏病理损伤均有较好的改善作用，确证毛菊苣水提取物具有较好的保肝活性，这一结果为维吾尔医将毛菊苣水提物用于保肝降酶提供了一定的实验依据，而关于其保肝活性的作用机制，仍有待于进一步的研究。
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Acute Toxicity Research of Cichorium Glandulosum Aqueous Extracts and It’s Protective Effect on Acute Liver Injury Mice
YANG Qiaoli, LIU Yan, SHI Yuzhu, WNAG Xue, SI Lijun, HUANG Hua*
(Xinjiang Institute of Materia Medica, Urumqi 830004, China)
ABSTRACT：OBJECTIVE To detect the acute toxicity of Cichorium glandulosum Boiss.et Huet aqueous extracts(MS), and to research the protective effect of MS on acute liver injury mice induced by D-GaIN, BCG+LPS and ANIT.METHODSThe mice were randomly divided into the treatment group and the normal group in acute toxicity test. The mortality, changes of the body weigh and feed intake of animals were measured. After 14 d, all mice were killed and grossly anatomized, then the internal organs were observed. Liver-protective experiment： Mice were divided into normal group, model group, positive drug group, the low and high dose groups of MS(0.13, 0.26 g·kg-1). Acute liver injury mice mode1 were induced by D-GaIN, BCG+LPS and ANIT. Then blood from eyeball was used to examine level of serum ALT, AST, TBIL and DBIL. The 1iver index was determined. And the pathologic section of the 1iver was stained for HE expression.RESULTSAcute toxicity test in mice to the single dose of maximum dose of 150 g·kg-1without death and other acute toxicity reaction. In D-GaIN induced chemical liver injury model, MS significantly reduced D-GaIN induced ALT, AST and TBIL at 0.26 g·kg-1(P＜0.05 or P＜0.01). In the immune liver injury mode, MS significantly (P＜0.01)reduced BCG+LPS induced ALT, AST at 0.13 and 0.26 g·kg-1, but had no influence on TBIL. In the model of jaundice induced liver injury, MS significantly reduced ANIT induced ALT, AST, TBIL and DBIL at 0.26 g·kg-1(P＜0.01). In addition, MS significantly reduced TBIL and DBIL at 0.13 g·kg-1(P＜0.01). Pathologic examination showed liver injury had significantly improved in each treatment groups.CONCLUSIONThere are not exist the acute toxicity of MS in treatment mice with maximum dose 150 g·kg-1. And, MS has a protective effect on acute liver injury.
KEY WORDS：Cichorium glandulosum Boiss.et Huet aqueous extracts; D-GaIN; BCG+LPS; liver injury; acute toxicity
中图分类号：R285.5
文献标志码：A
文章编号：1007-7693(2017)07-0957-07
DOI：10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2017.07.006
引用本文：杨巧丽, 刘燕, 史玉柱, 等. 毛菊苣水提取物急性毒性及其保肝作用研究[J]. 中国现代应用药学, 2017, 34(7)：957-963.
收稿日期：2017-03-01
(本文责编：曹粤锋)
基金项目：新疆维吾尔自治区公益性科研院所基本科研业务经费资助项目(KY2014061)
作者简介：杨巧丽，女，硕士，高级实验师 Tel： (0991)2322783 E-mail： qiaoliyang111108@163.com*
通信作者：黄华，女，硕士，研究员 Tel： (0991)2812061 E-mail： huangh6505@163.com